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Evaluation of the Specificity and Sensitivity of Two Commercial Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Kits, the Serum Plate Agglutination Test, and the Hemagglutination-Inhibition Test for Antibodies Formed in Response to Mycoplasma gallisepticum

Alan P. Avakian, S. H. Kleven and J. R. Glisson
Avian Diseases
Vol. 32, No. 2 (Apr. - Jun., 1988), pp. 262-272
DOI: 10.2307/1590813
Stable URL: http://www.jstor.org/stable/1590813
Page Count: 11
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Evaluation of the Specificity and Sensitivity of Two Commercial Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Kits, the Serum Plate Agglutination Test, and the Hemagglutination-Inhibition Test for Antibodies Formed in Response to Mycoplasma gallisepticum
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Abstract

Two commercial enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits, seven serum plate agglutination (SPA) antigens, and the hemagglutination-inhibition (HI) test for antibodies to Mycoplasma gallisepticum (MG) were compared for sensitivity and specificity using known MG-positive and MG-negative sera from leghorn chickens. All SPA antigens proved to be highly sensitive when testing MG-positive sera. Laboratory-prepared SPA antigens yielded fewer positive reactions when testing MG-negative sera than commercial SPA antigens. Both MG ELISA kits showed high rates of positive reactions when testing sera from birds given commercial M. synoviae bacterin, fowl coryza (Haemophilus paragallinarum) bacterin, inactivated infectious bursal disease virus vaccine, and to a lesser extent fowl cholera (Pasteurella multocida) bacterin. Immunization with Frey's medium with 12% swine serum-in-oil or Staphylococcus aureus-in-oil resulted in sera which yielded numerous positive ELISA reactions. During the first 1 to 3 weeks, antibodies induced by experimental infection with MG were better detected by the SPA test than by the ELISAs and the HI test, thus confirming the SPA test's importance in Mycoplasma diagnostic serology. The HI test can serve to confirm positive SPA results. /// Usando sueros identificados como positivos y negativos contra Mycoplasma gallisepticum (MG) obtenidos de aves tipo leghorn, se comparó la sensibilidad y especificidad de dos preparaciones comerciales del inmunoensayo con enzimas asociados (ELISA), siete antígenos de la prueba de aglutinación en placa para el suero, y la prueba de inhibición de la hemoaglutinación. Se comprobó que todos los antígenos de la prueba rápida en placa fueron altamente sensibles cuando se probaron frente a sueros positivos de MG. Los antígenos para la prueba rápida en placa preparados en el laboratorio dieron menos reacciones positivas que los antígenos comerciales cuando se probaron frente a sueros negativos de MG. Ambas preparaciones comerciales para la prueba ELISA contra MG mostraron altos porcentajes de reactividad positiva cuando se probaron frente a sueros provenientes de aves que habían sido vacunadas con bacterinas comerciales de M. synoviae, coriza (Haemophilus paragallinarum), vacuna inactivada contra la enfermedad infecciosa de la bolsa y, en menor grado, contra la bacterina de cólera aviar (Pasteurella multocida). La inmunización con medio Frey con 12% de suero porcino en aceite o con Staphylococcus aureus en aceite dió como resultado sueros con numerosas reacciones positivas. Los anticuerpos inducidos por la infección experimental con MG fueron detectados con más éxito entre la primera y tercera semana con el antígeno de aglutinación en placa que con las pruebas ELISA o de inhibición de la hemoaglutinación, confirmando así la importancia de la prueba en placa en el diagnóstico serológico de Mycoplasma. La prueba de inhibición de la hemoaglutinación puede servir para confirmar los resultados positivos obtenidos a la prueba en placa.

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