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Detection of Antibodies to Avian Pneumovirus by a Micro-Indirect Immunofluorescent Antibody Test

Y. Usami, M. Mase, O. Yamaguchi and K. Imai
Avian Diseases
Vol. 43, No. 3 (Jul. - Sep., 1999), pp. 384-390
DOI: 10.2307/1592635
Stable URL: http://www.jstor.org/stable/1592635
Page Count: 7
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Detection of Antibodies to Avian Pneumovirus by a Micro-Indirect Immunofluorescent Antibody Test
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Abstract

A micro-indirect immunofluorescent antibody (micro-IFA) test with a 96-well, flat-bottomed microplate was developed for measuring avian pneumovirus (APV) antibodies. Two Japanese APV strains (MM-1, 8597/CV94) isolated at different places and times and Vero cells were used for antigen preparation in this test. The test results were compared with those of a serum neutralization (SN) test. By the micro-IFA test, specific immunofluorescent antigens were observed in the cytoplasm of cells infected with either strain, and the antibody titers of antisera to these strains were quite similar. In most cases, the results were obtained within 3 hr. Antibody titers between the micro-IFA and SN tests were highly correlated, with correlation coefficients of 0.873 (MM-1 strain) and 0.889 (8597/CV94 strain). We also investigated APV antibody status in two farms for a period of about 2 yr by the micro-IFA test and revealed that APV infections were repeated within these farms. On the basis of these results, we conclude that our micro-IFA test is useful for routine serologic surveys of APV infections, particularly when a large number of samples are to be treated, because this test was time and labor saving relative to SN tests or conventional IFA tests utilizing embryo tracheal organs or coverslip cell cultures. /// Se desarrolló una microprueba indirecta de anticuerpos fluorescentes utilizando microplacas de 96 celdillas de fondo plano para medir anticuerpos contra el pneumovirus aviar. Para la preparación del antigeno se utilizaron dos cepas Japonesas de pneumovirus aviar (MM-1 y 8597/CV94) aísladas en diferentes lugares y fechas. El antígeno fue preparado en células Vero. Los resultados de la prueba fueron comparados con los obtenidos con la prueba de suero neutralización. Mediante la microprueba indirecta de inmunofluorescencia se observaron antígenos específicos inmunofluorescentes en el citoplasma de células infectadas con cualquiera de las dos cepas y los títulos de anticuerpos del antisuero para estas cepas fueron muy similares. En la mayorí de los casos, los resultados fueron obtenidos en tres horas. Se observó muy buena correlación entre los títulos de anticuerpos obtenidos con la microprueba de anticuerpos fluorescentes y la suero neutralización. Los coeficientes de correlación fueron de 0.873 con la cepa MM-1 y 0.889 con la cepa 8597/CV94. También se realizó una investigación sobre los niveles de anticuerpos contra el pneumovirus aviar en dos granjas durante un período de dos años utilizando la microprueba indirecta de anticuerpos fluorescentes. En estas dos granjas se encontraron anticuerpos contra el virus en varias ocasiones. Basados en estos resultados, se concluye que la microprueba indirecta de anticuerpos fluorescentes es útil para encuestas serológicas de rutina para pneumovirus, especialmente cuando se están procesando un gran número de muestras ya que esta prueba necesitó relativamente menos tiempo y trabajo comparada con la suero neutralización y las pruebas convencionales de inmunofluorescencia utilizando cultivo de tráquea o cultivo de tejido.

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