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Evaluation of a Competitive ELISA for Detection of Antibodies against Avian Influenza Virus Nucleoprotein

E.-M. Zhou, M. Chan, R. A. Heckert, J. Riva and M.-F. Cantin
Avian Diseases
Vol. 42, No. 3 (Jul. - Sep., 1998), pp. 517-522
DOI: 10.2307/1592678
Stable URL: http://www.jstor.org/stable/1592678
Page Count: 6
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Evaluation of a Competitive ELISA for Detection of Antibodies against Avian Influenza Virus Nucleoprotein
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Abstract

A competitive enzyme-linked immunosorbent assay (C-ELISA) employing a baculovirus-expressed recombinant nucleoprotein and a monoclonal antibody was developed for the detection of antibodies to type A influenza virus nucleoprotein. The performance of the C-ELISA was evaluated by testing 756 chickens, 1123 turkeys, 707 emus, and 1261 ostriches, for a total of 3847 serum samples. Relative to the agar gel immunodiffusion (AGID) test, the C-ELISA had a sensitivity of 100% for all four species. The C-ELISA's sensitivity relative to the hemagglutination-inhibition (HI) test results was 100% for chicken, turkey, and emu and 96.2% for the ostrich serum samples. More than 90% of the AGID-negative/C-ELISA-positive serum samples were found positive by HI for at least one influenza serotype. The specificity of C-ELISA relative to AGID ranged from 85.5% to 99.8% for sera collected from these species. These results indicated that the C-ELISA was more sensitive and more specific than the AGID test and as sensitive and as specific as the HI test. The C-ELISA has the potential to replace the AGID test for screening sera from avian species, including ratites, for detection of antibodies to type A influenza virus. /// Para la detección de anticuerpos contra la nucleoproteína del virus de influenza aviar tipo A, se desarrolló una prueba competitiva de inmunoensayo con enzimas asociadas (ELISA) empleando una nucleoproteína recombinante expresada en un baculovirus y un anticuerpo monoclonal. La eficacia de la prueba ELISA competitiva se evaluó examinando 756 sueros de pollos, 1123 de pavos, 707 de emúes y 1261 de avestruces, para un total de 3847 muestras de suero. Comparada con la prueba de inmunodifusión en agar, la prueba ELISA competitiva tuvo una sensibilidad del 100% en todas las cuatro especies. La sensibilidad de la prueba ELISA competitiva comparada con la prueba de inhibición de la hemoaglutinación (HI) fue del 100% para los sueros de pollos, pavos y emúes, y del 96.2% para los sueros de avestruces. Más del 90% de los sueros negativos en la prueba de inmunodifusión en agar y positivos en la prueba ELISA competitiva fueron positivos a la prueba de HI para al menos un serotipo de influenza. La especificidad de la prueba ELISA competitiva comparada con la prueba de inmunodifusión en agar varió del 85.5% al 99.8% en todos los sueros tomados de las diferentes especies. Estos resultados indican que la prueba ELISA competitiva fue más sensible y más específica que la prueba de inmunodifusión en agar, y fue tan sensible y tan específica como la prueba de inhibición de la hemoaglutinación. La prueba ELISA competitiva tiene el potencial de reemplazar la prueba de inmunodifusión en agar para examinar sueros de diferentes especies, incluyendo rátidos, para la detección de anticuerpos contra el virus de influenza tipo A.

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