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Journal Article

Sequence Analysis of the Hemagglutinin Gene of H9N2 Korean Avian Influenza Viruses and Assessment of the Pathogenic Potential of Isolate MS96

Chang-Won Lee, Chang-Seon Song, Youn-Jeong Lee, In-Pil Mo, Maricarmen Garcia, David L. Suarez and Sun-Joong Kim
Avian Diseases
Vol. 44, No. 3 (Jul. - Sep., 2000), pp. 527-535
DOI: 10.2307/1593091
Stable URL: http://www.jstor.org/stable/1593091
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Sequence Analysis of the Hemagglutinin Gene of H9N2 Korean Avian Influenza Viruses and Assessment of the Pathogenic Potential of Isolate MS96
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Abstract

Sequence analysis of the hemagglutinin (HA) gene of five Korean H9N2 avian influenza virus (AIV) isolates showed that these viruses were closely related and possibly came from the same source. Phylogenetic analysis of the HA1 subunit of H9 subtype isolates revealed that Korean AIV isolates were different from isolates from the poultry markets in Hong Kong in 1997. None of the Korean AIVs had multiple basic amino acids at the HA cleavage site that confer high pathogenicity to some H5 and H7 AIVs. Phylogenetic analysis of the nucleoprotein and matrix gene demonstrated that Korean isolates cluster with Eurasian origin AIVs. The pathogenic potential of one of the isolates (MS96) was assessed after several passages in 14-day-old embryonated chicken eggs (ECE). Fourteen-day-old ECE derivatives of MS96 showed increased HA titer and embryo mortality in eggs; this was apparent after the third passage in 14-day-old ECE. Sequence analysis of the cleavage site of MS96 after the third and tenth passages in 14-day-old ECE revealed no changes in the amino acid sequence. The pathogenicity of MS96 after the tenth passage in 14-day-old eggs (MS96p10(ECE14)) was tested with 4-wk-old specific-pathogen-free chickens. The 14-day-old derivative, MS96p10(ECE14), showed wider tissue tropism and induced more severe clinical signs than the parent virus. Furthermore, after intranasal inoculation of 86-wk-old broiler breeders and 30-wk-old layers, the MS96p10(ECE14) derivative induced more severe signs of depression than the parent virus as well as a transient drop in egg production. /// El análisis de secuencia del gen hemaglutinina de cinco cepas H9N2 del virus de influenza aviar aisladas en Corea, mostró que estos virus estaban estrechamente relacionados entre sí y posiblemente venían de la misma fuente. El análisis filogenético de la subunidad HA1 de las cepas del subtipo H9 reveló que las cepas del virus de influenza aviar de Korea eran diferentes de las aisladas de los mercados avícolas de Hong Kong en 1997. Ninguna de las cepas del virus de influenza aviar tenía múltiples amino ácidos básicos en el sitio de segmentación que confiere alta patogenicidad a algunos virus H5 y H7 de influenza aviar. El análisis filogenético de la nucleoproteína y del gen matrix demostraron que las cepas de Corea se agrupaban con los virus de influenza aviar de origen Euroasiático. El potencial patógeno de la cepa MS96 fue determinado después de varios pasajes en embriones de pollo de 14 días de edad. Los virus derivados de la cepa MS96 después de estos pasajes mostraron un aumento en el título y en la mortalidad de los embriones, siendo más evidente después del tercer pasaje en embriones de 14 días de edad. El análisis de la secuencia de los sitios de segmentación de la cepa MS96 después del tercer y décimo pasaje en embriones de 14 días de edad no reveló cambios en la secuencia de amino ácidos. Se determinó la patogenicidad de la cepa MS96 después del décimo pasaje en embriones de 14 días de edad (MS96p10) en pollos libres de patógenos específicos de 4 semanas de edad. Esta cepa MS96p10 mostró mayor tropismo e indujo signos clínicos transitorios más severos que el virus original. Además, la inoculación intranasal de esta cepa MS96p10 en reproductoras de engorde de 86 semanas de edad y en ponedoras de 30 semanas indujo signos de depresión más severos como también mayor pérdida en la producción de huevo que el virus original.

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