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Comparison of Virus Isolation, Immunohistochemistry, and Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction Procedures for Detection of Turkey Coronavirus

Jamie J. Breslin, Lynda G. Smith, H. John Barnes and James S. Guy
Avian Diseases
Vol. 44, No. 3 (Jul. - Sep., 2000), pp. 624-631
DOI: 10.2307/1593102
Stable URL: http://www.jstor.org/stable/1593102
Page Count: 8
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Comparison of Virus Isolation, Immunohistochemistry, and Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction Procedures for Detection of Turkey Coronavirus
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Abstract

A reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) procedure and two monoclonal antibody (MAb)-based immunohistochemical procedures were developed for detection of turkey coronavirus (TCV) in tissues and intestinal contents/dropping samples. The RT-PCR, MAb-based fluorescent antibody (FA), and MAb-based immunoperoxidase (IP) procedures were compared with virus isolation (VI) for detection of TCV in experimentally infected turkeys. TCV was detected in experimentally infected turkeys as early as day 1 postexposure (PE) by each of the four detection procedures. TCV was detected as late as day 35 PE by FA or IP and days 42 and 49 PE by VI and RT-PCR, respectively. With VI as a reference, sensitivity and specificity of RT-PCR were 93% and 92%, respectively; specificity of both FA and IP was 96%, and sensitivities were 69% and 61%, respectively. Each of the examined procedures was highly specific, but the RT-PCR procedure was also highly sensitive. These findings demonstrate the utility of both immunohistochemistry and RT-PCR for detection of TCV. In addition, the findings indicate that RT-PCR is a highly sensitive and specific alternative to conventional diagnostic procedures. /// Se desarrollaron una prueba de reacción en cadena por la polimerasa transcriptasa reversa (de las siglas en inglés RT-PCR) y dos procedimientos inmunohistoquímicos basados en anticuerpos monoclonales para la detección del coronavirus de pavos en muestras de tejidos y de materia fecal. La prueba RT-PCR, la inmunofluorescencia con anticuerpos monoclonales y la prueba de la inmunoperoxidasa con anticuerpos monoclonales fueron comparados con el aislamiento viral para la detección del coronavirus en pavos infectados experimentalmente. Se pudo detectar el coronavirus de pavos desde el primer día después de la infección por medio de cada uno de los cuatro procedimientos. El coronavirus de pavos se pudo detectar incluso hasta el día 35 por medio de la prueba de la inmunofluorescencia y la prueba de la inmunoperoxidasa y hasta el día 42 y el día 49 por medio del aislamiento viral y el RT-PCR, respectivamente. Con el aislamiento viral como referencia, la sensibilidad y la especificidad de la reacción en cadena por la polimerasa fue de 93% y 92%, respectivamente. La especificidad de la inmunofluorescencia y de la inmunoperoxidasa fue de 96% y la sensibilidad fue de 69% y 61%, respectivamente. Cada uno de los procedimientos examinados fue altamente específico pero la prueba RT-PCR fue también altamente sensible. Estos hallazgos demostraron la utilidad de la inmunohistoquímica y el RT-PCR para la detección del coronavirus de pavo. Además, los hallazgos inidican que el RT-PCR es una alternativa altamente sensible y específica a los procedimientos convencionales de diagnóstico.

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