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Enzyme-linked immunosorbent assay of polygalacturonases in cotton plants infected by Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum / Nachweis von Polygalakturonasen mit dem ELISA-Test in Baumwollpflanzen infiziert mit Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum

G. Suresh, R. Balasubramanian and R. Kalyanasundaram
Zeitschrift für Pflanzenkrankheiten und Pflanzenschutz / Journal of Plant Diseases and Protection
Vol. 91, No. 2 (April 1984), pp. 122-130
Published by: Verlag Eugen Ulmer KG
Stable URL: http://www.jstor.org/stable/43382697
Page Count: 9
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Enzyme-linked immunosorbent assay of polygalacturonases in cotton plants infected by Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum / Nachweis von Polygalakturonasen mit dem ELISA-Test in Baumwollpflanzen infiziert mit Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum
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Abstract

An attempt was made to detect the polygalacturonase produced by Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum in infected cotton plants using enzyme-linked immunosorbent assay. Polygalacturonase was purified by a combination of ammonium sulphate precipitation and CMSephadex C-25 column chromatography. The purity of polygalacturonase-active fractions was tested by polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE), isoelectric focusing and immunoserological techniques. Ion exchange chromatography of polygalacturonase showed a complex of three isoenzymes. Antibodies were raised in rabbits against purified polygalacturonases using three different immunization protocols. The results indicate a correlation between macroscopic symptoms in infected cotton plants and production of polygalacturonases in vivo, as measured by ELISA assay. Es wurde der Versuch unternommen, mit Hilfe des ELISA-Tests die von Fusarium oxysporum f, sp, vasinfectum in infizierten Baumwollpflanzen gebildete Polygalakturonase nachzuweisen. Die Polygalakturonase wurde durch eine Kombination von Ammoniumsulfat-Fällung und Säulenchromatographie an CM-Sephadex C-25 gereinigt. Die Reinheit der Fraktionen, die Polygalakturonase-Aktivität enthielten, wurde mittels Elektrophorese in Polyacrylamidgel, isoelektrischer Fokussierung und immunserologischer Methoden überprüft. Ionenaustauscher-chromatographische Untersuchungen der Polygalakturonase ließen einen Komplex von drei Isoenzymen erkennen. Antikörper gegen die gereinigte Polygalakturonase wurden unter Verwendung von drei verschiedenen Immunisierungsprogrammen erzeugt. Die Ergebnisse der ELISA-Tests deuten auf eine Korrelation zwischen makroskopischen Symptomen an infizierten Baumwollpflanzen und der in vivo-Bildung von Polygalakturonasen hin.

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